Все госты и снипы онлайн

Более 10000 документов в открытом доступе, абсолютно бесплатно

ГОСТ 26072-89 - Животные и птица сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики туберкулеза

Этот документ был распознан автоматически. В блоке справа Вы можете найти скан-копию. Мы работаем над ручным распознаванием документов, однако это титанический труд и на него уходит очень много времени. Если Вы хотите помочь нам и ускорить обработку документов, Вы всегда можете сделать это, пожертвовав нам небольшую сумму денег.

Файлы для печати:

Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й С Т А Н Д А Р Т С О Ю З А С С Р ЖИВОТНЫЕ И ПТИЦА " о СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ М ЕТО ДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУ БЕРК У Л ЕЗА ГОСТ 2 6 0 7 2 - 8 9 (СТ СЭВ 3 4 5 7 - 8 1 ) болеро интернет магазин
УДК 636:576.8.07:006.354 Группа С79 Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й С Т А Н Д А Р Т С О Ю З А С С Р Ж И В О ТН Ы Е И ПТИЦА СЕЛЬСКО ХО ЗЯЙ СТВЕН НЫ Е ГОСТМ етоды лабораторной диагностики 2 6 0 7 2 -8 9т у б ер кулеза (CT СЭВ 3 4 5 7 - 8 1 ) Agricultural animals and poultry. Methods ol laboratory diagnostics of tuberculosis ОКСТУ 9809Срок действияс 0 1 .0 7 .9 0до 0 1 .0 7 .9 5Н есоблю дение с т ан д ар т а п реследуется по закону Настоящий стандарт распространяется на все виды сельско­ хозяйственных животных и птиц и устанавливает методы лабо­ раторной диагностики заболевания туберкулезом, вызываемого ми­ кобактериями М. bovis, М. tuberculosis, М. avium. Стандарт применяют для установления заболевания животных и птицы в республиканских, областных ветеринарных лаборато­ риях, а также лабораториях научно-исследовательских учрежде­ ний при исследовании биоматериала от животных при экспортно­ импортных операциях. Диагноз на туберкулез у животных устанавливают на основа­ нии патологоанатомических, бактериологических, вхлючая биоло­ гическую пробу, и аллергических методов лабораторной диагно­ стики с учетом эиизоотологичсских данных и клинических призна­ ков болезни. Лабораторные исследования на туберкулез проводят в срок не более 90 дней, идентификацию культуры — в срок не более 90 дней после ее выделения. I. ОТБОР ПРОБ 1.1. Пробу для проведения анализов отбирают от каждого жи­ вотного в отдельности. 1.2. Для анализа отбирают пробы лимфатических узлов мле­ копитающих: заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средо­ стенные, брыжеечные; лимфатические узлы, взятые в области илеоцекального соединения и подвздошной кишки, упаковывают Иэдаике официальноеПерепечатка воспрещена © Издательство стандартов. 1989
С 2 ГОСТ 26072—89 отдельно от остальных лимфатических узлов. Портальные, предлопаточные, нздвыменные. поверхностные паховые лимфатические узлы и внутренние органы (легкие, печень, почки) направляют только при наличии изменений, подозрительных на туберкулез. Парные лимфатические узлы вырезают с обеих сторон туши, указав их название на этикетке, которую помещают вместе с про­ бой. Тушки (трупы) птиц для исследования направляют в лабо­ раторию целиком. 1.3. Пробы патологического материала, отобранные для бактериоскопического, бактериологического и биологического анали­ зов, доставляют в лабораторию в свежем или замороженном виде. Допускается консервировать пробы в 30%-ном водном растворе химически чистого глицерина. Пробы хранят до окончания лабораторного исследования. 2. МЕТОД БАКТЕРИОСКО11ИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Сущность метода заключается в выявлении микобактерий ту­ беркулеза путем бактериоскопии мазков из нативного материала. 2.1. А п п а р а т у р а , м а т е р и а л ы и р е а к т и в ы Термостат с автоматическим регулированием температуры, обеспечивающий температурный режим 37—38°С. Микроскоп иммерсионный с контрастным приспособлением МБИ или М БР по ГОСТ 8284 или других аналогичных марок. Осветитель типа ОИ-19. Стекла предметные по ГОСТ 9284. Фильтры бумажные. Кислота кзрболовая кристаллическая. Спирт этиловый ректификованный 96%-ный по ГОСТ 18300. Спирт солянокислый 3%-ный; готовят следующим образом: бе­ рут 3 см3 концентрированной соляной кислоты по ГОСТ 3118 и добавляют ее к 97 см3 70% -ного этилового спирта. Калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор с массовой до­ лей 1%. Метиленовый голубой кристаллический. Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. Фуксин основной. Глицерин. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709. Масло иммерсионное для микроскопа по ГОСТ 13739. Синь метиленовая (метиленовый голубой), высушенный спир­ товой раствор; готовят следующим образом: к 8 —9 г кристалли­ ческого метиленового голубого добавляют 100 см3 этилового спирта. Синька Леффлера метиленовая, водно-спиртовой раствор; го­ товят следующим образом: 30 см3 насыщенного спиртового раство-
ГОСТ 2 6 0 7 2 -8 9 С. 3 ра метиленовой сини пропускают через бумажный фильтр, при­ бавляют 1 см3 раствора гидроокиси калия с массовой долей I % и разбавляют 100 см3 дистиллированной воды. Раствор устойчив ** течение длительного времени. Фуксин Циля карболовый, водно-спиртовой раствор; готовят следующим образом: 1 г основного кристаллического фуксина рас­ тирают в ступке с 5 г кристаллической карболовой кислоты И' 0,5 см* глицерина, прибавляя небольшими порциями 10 см3 эти­ лового спирта. После измельчения краски прибавляют при посто­ янном помешивании 100 см* дистиллированной воды. Раствор краски выдержав в термостате 24 ч фильтруют через бумажный фильтр. Фуксин Циля хранят во флаконах из темного стекла с притертой пробкой. 2.2. П о д г о т о в к а к а н а л и з у 2.2.1. Мазки патологического материала готовят, используя чистые обезжиренные предметные стекла. Готовят по два маз­ ка— из каждого органа и лимфатического узла. Мазки высушива­ ют на воздухе, фиксируют над пламенем и окрашивают по Циль- Нил ьсену. Для окрашивания мазков по Циль-Нильсену на фиксирован­ ный мазок кладут кусочек фильтровальной бумаги, наливают на нее карболовый раствор фуксина Циля и нагревают до момента появления паров (два-три раза) в течение 5 мин, но не доводя краситель до кипения, раствор краски при этом каждый раз до­ бавляют. Даю т препарату остыть, удаляют пинцетом бумагу, сли­ вают избыток красителя и препарат промывают водой. Мазок обесцвечивают 3%-ным растнором солянокислого спирта до до­ стижения слабозаметного розового оттенка. После обесцвечива­ ния препарат тщательно промывают водой и окрашивают мети­ леновой синькой Леффлера в течение 3 —5 мин. Краску смывают, мазок промывают водой и высушивают на воздухе. 2.3. П р о в е д е н и е а н а л и з а 2.3.1. Мазки просматривают под микроскопом. При отсутствии микобактерий просматривают в каждом мазке не менее 50 полей зрения. 2.4. О б р а б о т к а р е з у л ь т а т о в 2.4.1. Для микобактерий туберкулеза характерны тонкие, пря­ мые или изогнутые красные палочки различной длины, часто зернистые. Они располагаются небольшими скоплениями или еди­ ничны. 3. МЕТОД БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Сущность метода заключается в выделении культур микобак­ терий туберкулеза и определении скорости роста и характера бак­ терий.
С. 4 ГОСТ 2в072—89 3.1. А п п а р а т у р а , м а т е р и а л ы и р е а к т и в ы Термостат с автоматическим регулированием температуры, обеспечивающий температурный режим от 37 до 38°С.Х о л о д и л ь н и к .Шкаф сушильный, обеспечивающий регулирование температу­ ры от 100 до 200 °С. Аппарат для встряхивания (шут гель-аппарат). Центрифуга лабораторная с частотой вращения 3000 мин-1. Автоклав с рабочим давлением 1,5 КПА по ГОСТ 19569. Ступки с пестиками вместимостью 50 и 100 см3 по ГОСТ 9147. Песок или стекло стерильное. Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 см3 по ГОСТ 20292. Флаконы псннцилиновыс. Пробирки бактериологические по ГОСТ 25336. Стекла предметные по ГОСТ 9284. Пробирки центрифужные. Ножницы. Лупа с увеличением 3 —5 х . Шпатель. Петли бактериологические. Колбы конические вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336. Пробки ватно-марлевые. Ксилол по ГОСТ 9949 или бензин авиационный Кислота щавелевая по ГОСТ 22180, растворы концентрацией 5 и 10%. Кислота серная по ГОСТ 4204, растворы концентрацией 3 — 5 и 6% . Эфир. Натрий хлористый по ГОСТ 4233, раствор с массовой долей 0,85% pH 7.0. Натрия гидроокись, раствор с массовой долей 1 н 4% . Парафин по ГОСТ 23683. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709. Среды питательные: Левенштейна-йенсена, Петраньянн. Тель­ фер га, Финн-2, Мордовского, сухая среда Левенштейна-йенсена, яичная, мяеопептонный агар (.МПА), мясопептониый бульон (М П Б ). Для контроля стерильности среды помещают на 20—24 ч п термостат с температурой 37—3 8 °С. Допускается при посевах упо­ треблять среды, приготовленные не более чем за 14 сут до испы­ тания. Хранят среды в сухом прохладном месте. 3.2. П о д г о т о в к а к а н а л и з у 3.2.1. Для посева на питательные среды патологический мате­ риал подвергают предварительной обработке, гомогенезирун и подвергая воздействию для уничтожения сопутствующей микро-
ГОСТ 2 8 0 7 2 -8 9 С 5 флоры. Предварительная обработка должна быть щадящей для микобактерий туберкулеза. 3.2.2. Из каждого доставленного лимфатического узла выреза­ ют кусочки размером 0,5 см3 на границе здоровой и измененной ткани. Общая масса лимфоузлов для исследования составляет около 6 — 10 г. Брыжеечные лимфатические узлы, взятые в облас­ ти илеоцекального соединения и подвздошной кишки обрабатыва­ ют и высевают отдельно от других лимфатических узлов. 3.2.3. Кусочки органов и тканей свежие или отмытые дистил­ лированной водой от консервирующей жидкости, обрабатывают одним из методов, указанных ниже. Метод Гона-Левенштейна-Сумиоши. Кусочки материала измель­ чают ножницами в ступке, тщательно растирают пестиком со сте­ рильным песком или стеклом и заливают в зависимости от све­ жести материала растворами серной кислоты концентрацией 3 — 5 или 6% или раствором щавелевой кислоты концентрацией 5 или 10% в соотношении: на I объемную часть материала 4 части кислоты. Пробу центрифугируют в течение 10— 15 мин частотой вращения 3000 мин-*. Общая экспозиция контакта с кислотой не должна превышать 30 мни. Надосадочную жидкость сливают, оса­ док отмывают 2—3 раза физиологическим раствором с помощью центрифугирования и используют для посевов, нанося и втирая его шпателем на поверхность яичной среды. Метод Аликаевой. Ткани разрезают на кусочки размером 0,5 см3, помещают в ступку, заливают раствором серной кислоты концентрацией 3—5 или 6% и оставляют на 10—20 мин. Ступку накрывают стерильной пергаментной бумагой. Затем кислоту сли­ вают. материал промывают два-три раза в течение 5 — 10 мин фи­ зиологическим раствором, после чего раствор удаляют и кусочки ткани тщательно растирают с незначительным объемом свежего физиологического раствора (1— 1,5 см3). Из полученной взвеси делают посевы и мазки, а к оставшейся доливают физиологичес­ кий раствор в количестве, необходимом для заражения животных (1 см3 на одно животное). 3.2.4. Для концентрации микобактерий в исследуемом мате­ риале применяют метод флотации. Материал растирают в ступке с физиологическим раствором до консистенции сметаны. В узко­ горлую колбу вместимостью 250 см3 помещают 10 см3 исследуе­ мого материала, добавляют равное количество 1%-ного раствора гидроокиси натрия. Смесь тщательно встряхивают (нс более 10 мин) в специаль­ ном аппарате или вручную до получения однородной консистен­ ции. Затем гомогенеэированиый материал разбавляют и соотно­ шении 1 : 9 дистиллированной водой и прибавляют 1—2 см3 кси­ лола или авиационного бензина. Смесь вновь встряхивают в тече­ ние 5 — 10 мин, добавляют дистиллированную воду (до горлышка
С. 6 ГОСТ 2 6072-80 колбы) и оставляют на 30 мин при комнатной температуре. Ми­ кобактерии туберкулеза концентрируются во флотационном ра­ створе у горлышка колбы. Для приготовления мазков содержимое образовавшегося коль­ ца осторожно отсасывают пипеткой и наносят по мере подсыхания несколько раз на предметное стекло. Для посевов на питательные среды пенистую часть флотационного кольца переносят пастеров­ ской пипеткой в стерильные пробирки, добавляя приблизительно равное количество 3 —5 или 6%-ного раствора серной кислоты. Пробирки тщательно встряхивают в течение 3 —5 мин и оставля­ ют на 10 мнн. Содержимое вновь образовавшегося компактного кольца засевают петлей-ракеткой в пробирки с питательной сре­ дой. 3.3. П р о в е д е н и е а н а л и з а 3.3.1. Подготовленный для исследования материал высенают в 5 — 10 пробирок с питательной средой Левенштейна-йенсена или Гельберга, Пстраньяни, Финн-2, Мордовского. В 5 пробирок тех же сред высевают взвесь из брыжеечных лимфоузлов и в одну пробирку с мясопеитонным агаром (МПА) и мясопептонным буль­ оном (М П Б ). Посев проводят пастеровской пипеткой или плати­ новой петлей, осторожно втирая материал по всей поверхности питательной среды. Засеянные пробирки укладывают в наклонном положении и помещают в термостат с температурой 3 7 —3 8 Х . Че­ рез 2 сут посевы просматривают и определяют восстановление цвета среды. Если цвет среды не восстановился, обработку и по­ сев повторяют. Пробирки, в которых появился рост посторонней микрофлоры, удаляют. В остальных ватно-марлевые пробки па­ рафинируют. Для выявления начального роста микобактерий все пробирки с посевами просматривают не менее одного раза н неделю. По­ севы выдерживают в термостате в течение 90 сут. При обнаруже­ нии роста микобактерий в первые 10 сут наблюдение за посевами продолжают в течение 3 мес. 3.3.2. Для дальнейшего изучения культуральных свойств де­ лают пересев выросших колоний микобактерий, предварительно накопив бактериальную массу для рассева на различные питатель­ ные среды (яичные, мясопептонный бульон (М П Б) и яичную сре­ ду с салицилатом натрия) н культивируют нх при температурах: 20—25, 37— 38 н 45°С. А л v Для пересева отбирают платиновой петлей (диаметр 2—3 мм) бактериальную массу и переносят в стерильную пробирку или пенициллиновый флакон. При неоднородном росте культуры от­ бирают колонии, наиболее характерные по внешнему виду для микобактерий туберкулеза. Бактериальную массу тщательно рас­ тирают в 1 — 1,5 см* физиологического раствора, который добав­ ляют небольшими порциями в пробирку (флакон).
ГОСТ 26Ю72—89 С 7 Приготовленную взвесь вносят по 2 —3 капли пастеровской пипеткой в шесть пробирок с плотной яичной средой (по две для каждого температурного режима), в две пробирки яичной среды с салнцилатом натрия и одну пробирку с мясолептонным бульо­ ном (М П Б ). На пробирках делают надписи с указанием номера экспертизы, даты пересева и температурного режима культиви­ рования. Пробки парафинируют и пробирки устанавливают в тер­ мостат при заданных температурах. Пробирки с посевами на мясопептонную среду и на яичную среду с салнцилатом натрия инкубируют в термостате при 3 7 —38 *С. 3.4. О б р а б о т к а р е з у л ь т а т о в 3.4.1. Для микобактерий туберкулеза бычьего вида характе­ рен рост через 2 0 —60 сут в виде скупо растущих мелких, шаро­ видных в глубине среды слегка возвышающихся цвета слоновой кости колоний. Реже встречаются культуры, образующие морщи­ нистые колонии. 3.4.2. Для микобактерий туберкулеза человеческого вида ха­ рактерен рост через 20—30 сут в виде морщинистых, сухих, цве­ та слоновой кости колоний. Это R -варианты культур микобакте­ рий (шероховатые), вирулентные для человека н животных. Ино­ гда встречаются S -варианты (гладкие) культуры. 3.4.3. Для микобактерий туберкулеза птичьего вида характер­ ны мягкие, слизистые (иногда с пуговицеобразным возвышением н кратеровидные углубления) серовато-белые, реже слегка жел­ товатые колонии. Культуры этого вида растут быстрее (10— 15 сут), чем микобактерии указанных выше видов. 3.4.4. 1Микобзктерни туберкулеза всех трех видов не образу­ ют пигмента и растут на яичных средах без салнцнлата натрия: бычьего и человеческого видов — при 37—3?°С , птичьего — 37— 38е и 45 °С. Микобактерии туберкулеза птичьего вида растут так­ же на яичной среде с салнцилатом натрия. 3.4.5. Атипичные микобактерии могут расти при разных тем­ пературах на яичных, а некоторые и на простых средах. 3.4.6. Культуры микобактерий непигментированные, даюшне рост при температуре 37—3 8 вС на яичных средах без салицина* та натрия более чем через 20 сут, и нс растущие в .мясопептоином бульоне (М П Б ), а такж е культуры, даюшне рост при темпе­ ратуре 37—38 и 45 С на яичных средах (включая среды с салицнлатом натрия) через 10 и более сут. подлежат исследованию биологическим методом. Культуры микобактерий, характеризующиеся ростом на яич­ ной среде с салнцилатом натрия или на простых средах, пигмен­ тированием, ростом при 2 2 °С, н дальнейшем биологическому ис­ следованию не подвергают.
с. 8 ГОСТ 28072-8» 4. МЕТОД БИОЛОГИЧЕСКОЯ ПРОБЫ Сущность метода заключается в воспроизведении туберкуле­ за при диагностическом исследовании материала и для опреде­ ления вида микобактерий туберкулеза. Исследование проводят, используя взвесь из материала (орга­ ны, лимфоузлы и др.) или культуру микобактерий, выделенную бактериологическим исследованием. 4.1. А п п а р а т у р а , м а т е р и а л ы и р е а к т и в ы Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.1, а также ука­ занные ниже. Весы лабораторные с погрешностью взвешивания не более 0,001 г. Шприцы вместимостью 1—2 см3. Иглы инъекционные JVk 0416. Натрий двууглекислый, раствор с массовой долей 10%. 4.2. П о д г о т о в к а к а н а л и з у 4.2.1. Патологический материал, взятый от животных и обрабо­ танный, как указано в п. 3.2.3, нейтрализуют стерильным водным раствором двууглекислого натрия с массовой долей 10%, о т­ стаивают до оседания крупных частиц и образовавшуюся надосадочную жидкость используют для инъекции лабораторным жи­ вотным. Взвесь готовят из расчета, чтобы для получения одной дозы (1 см3) было взято примерно 1 г исследуемого материала. 4.2.2. Для приготовления взвеси из культуры микобактерий, выделенной, как указано в разд. 3, бактериальную массу в коли­ честве 8— 10 мг снимают шпателем с поверхности плотной пита­ тельной среды и переносят в стерильный пенициллиновый флакон с резиновой пробкой, предварительно взвешенный. Затем флакон вновь взвешивают на аналитических весах и по разности между первой и второй массой флакона определяют массу взятой куль­ туры. Во флаконы добавляют физиологический раствор из расче­ та 1 см3 на 1 мг бактерийной массы. 4.3. П р о в е д е н и е а н а л и з а 4.3.1. Для постановки бипробы берут кроликов живой массой не менее 2000 г, морских свинок живой массой 300—350 г (же­ лательно светлой масти) и кур в возрасте нс моложе 150 сут. Биопробу проводят при диагностическом исследовании мате­ риала от млекопитающих — на двух морских свинках, от птиц — на двух курах. 4.3.2. Взвесь материала в дозе 1—2 см3 вводят морским свин­ кам подкожно в области паха, допускается интратестикулярное заражение морских свинок в дозе 0,2 см3 взвеси, курам — в под­ крыльцовую вену. 4.3.3. Через 30 сут после заражения свинок исследуют тубер­ кулиновой пробой. У морских свинок на боку выщипывают (или
ГОСТ 2 8 0 /2 -8 9 С. 9 выбривают) шерсть (лучше накануне исследования) и внутрикожно им вводят ППД-туберкулин для млекопитающих в доле 25 ТЕ (туберкулиновых единиц), растворенный в 0.1 см* раство­ рителя или стерильного физиологического раствора. Дозу 25 ТЕ ППД-туберкулина в 0.1 см3 растворителя получа­ ют следующим путем: во флакон с ППД-туберкулином вливают растворитель, содержащийся в прилагаемом к аллергену флако­ не, перемешивают и получают концентрацию 50 000 ТЕ/см3. Пос­ ле раствореиия ППД-туберкулнна 1 см1 раствора переносят н пробирку с 9 см3 физиологического раствора, перемешивают. З а­ тем 0.5 см3 этого раствора переносят во вторую пробирку с 9,5 см3 физиологического раствора и получают раствор, содержа­ щий в 0,1 см3 25 Е Д ППД-туберкулнна. Реакцию на туберкулин у морских свинок учитывают через 24 и 48 ч после введения ППД-туберкулина. Положительная ре­ акция проявляется гиперэмией кожи в месте введения ППД-ту­ беркулина и образованием уплотненной припухлости диаметром 5 мм и более, иногда с некрозом в центре. Курам вводят 0.1 см3 ППД-туберкулнна для птиц внутрикожно в бородку, реакцию учитывают через 30—36 ч. Положительная реакция характеризуется опуханием бородки. 4.3.4. Заражение’ животных культурами микобактерий, выде­ ленными из исходного материала, проводят для определения вида возбудителя туберкулеза. В этих целях двух морских свинок, двух кроликов и при необходимости двух кур ’заражают трех-четырех- дкевной культурой: морских свинок подкожно, кроликов — внут­ ривенно в краевую вену уха, кур — внутривенно в подкрыльцо­ вую вену в дозах по I мг микобактерий, суспендированных в 1 см3 физиологического раствора. Если бактериальная масса трудно растирается (суспензия должна быть гомогенной), ее сначала тщательно растирают с несколькими каплями физиологического раствора или бычьей желчи пестиком в ступке или стеклянной палочкой в пробирке, а затем к суспензии частями добавляют необходимый объем физиологического раствора. 4.4. О б р а б о т к а р е з у л ь т а т о в Определение видов микобактерий туберкулеза проводят на основании результатов патологоанатомического исследования под­ опытных лабораторных животных. 4.4.1. Микобактерии туберкулеза человеческого и бычьего ви­ дов у морских свинок вызывают развитие генерализованного ту­ беркулеза в период от 21 до 90 сут после введения материала (культуры). На месте введения материала (культуры) образует­ ся язва н наблюдается увеличение регионарного лимфатического узла. Морские свинки прогрессивно худеют. При вскрытии пав­ ших или убитых животных в регионарных к месту заражения па­ ховых лимфатических узлах на разрезе обнаруживают казеозные
С. 10 ГОСТ 20072—SO очаги. При генерализации процесса поражены и другие лимфати­ ческие узлы. Селезенка и печень увеличены, плотные, с серова­ тыми или желтоватыми мелкими сливающимися узелками. В лег­ ких много сероватых очажков. Микобактерии туберкулеза птичьего вида у морских свинок, как правило, вызывают только абсцесс в месте введения куль­ туры и увеличение регионарного пахового лимфатического узла. При заражении материалом изменений в органах и тканях у жи­ вотных не наблюдают. 4.4.2. Микобактерии туберкулеза бычьего вида у кроликов при внутривенном заражении в течение от 21 до 90 сут после зара­ жения вызывают генерализованный процесс, который характери­ зуется увеличением легких с множеством очажков, часто с на­ личием некрозов. В печени и селезенке поражения имеют вид не­ больших узелков, либо отсутствуют. В почках могут развиваться очаговые поражения. Микобактерии туберкулеза человеческого вида у кроликов не вызывают прогрессирующего процесса. Единичные очажки мож­ но обнаружить в легких и редко в почках. Чаще поражения от­ сутствуют. Микобактерии туберкулеза птичьего вида у кроликов вызыва­ ют, как правило, сепсис (тип Иерсена), характеризующийся рез­ ким увеличением селезенки. При атом гибель животных насту­ пает через 11 —30 сут. 4.4.3. Микобактерии туберкулеза человеческого и птичьего видов при внутривенном заражении кур не вызывают у них за­ болевания н каких-либо изменений в органах. Микобактерии туберкулеза птичьего вида вызывают гибель кур в течение 30 сут. Иногда куры выживают 6 0 —90 сут. На вскры­ тии у павших (или убитых) кур обнаруживают много серо-жел­ тых бугорков в печени и селезенке, а в окрашениых по Пнль- Нильсену мазках из органов— значительное количество микобак­ терий туберкулеза. 3. МЕТОД ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Сущность метода заключается в обнаружении в лимфатичес­ ких узлах и органах больных туберкулезом животных морфоло­ гических изменений. 5.1. А п п а р а т у р а , м а т е р и а л ы и р е а к т и в ы Аппаратура, материалы и реактивы— по п, 2.1, а также ука­ занные ниже. Микротом с микротомнымн ножами. Блоки деревянные. Стекла покровные по ГОСТ 6672. Спирт этиловый ректификованный, 96%-ный по ГОСТ 5962.
ГОСТ 26072—89 С. 11 Формалин по ГОСТ 1625, раствор массовой долей 10%. Углекислота. Парафин по ГОСТ 23683. Целлоидин. Эфир. Хлороформ по ГОСТ 20015. Бальзам пихтовый по ГОСТ 2290 или кедровый, или канад­ ский. Ксилол {пара, орта, мета) по ГОСТ 9949. Эрозии, раствор массовой долей 0,1% . Гематоксилин. Фуксии основной. 5.2. П о д г о т о в к а к а н а л и з у 5.2.1. Кусочки ткани заливают в целлоидин или парафин и приготавливают срезы. Срезы готовят также и на заморажива­ ющем микротоме. Препараты окрашивают гематоксилин-эозином. 5.3. П р о в е д е н и е а н а л и з а 5.3.1. Срезы просматривают под микроскопом. 5.4. О б р а б о т к а р е з у л ь т а т о в 5.4.1. Положительными результатами гистологического иссле­ дования, свидетельствующими о типичных для туберкулеза из­ менениях. считают наличие в органах и лимфатических узлах ча­ стично или полпостью объизвествлснпых некротических очаговказеозев, окруженных зоной эпителиондных, гигантских н лимфо­ идных клеток и соединительно тканной капсулой. 5.4.2. При дифференциальной диагностике туберкулеза учиты­ вают сходные изменении, наблюдаемые при гранулемах, образу­ ющихся при микозах и паразитарных болезнях. В этих случаях регионарные лимфатические узлы не поражены. В гранулемах микотического происхождения находят в некро­ зе мицелий гриба, при паразитарных — тело паразита и эозино­ фильно-клеточную пролиферацию в хапсулс. При паратуберкулезе наблюдают в брыжеечных лимфатичес­ ких узлах и кишечной стенке эпителиоодноклеточную пролифера­ цию без образования некрозов.
С. 12 ГОСТ 26072—8# ИН ФОРМ АЦИ ОН НЫЕ Д А Н Н Ы Е 1. РАЗРАБОТАН И ВН ЕСЕН Госагропромом С С С Р РАЗРАБОТЧИКИ СТАНДАРТА Н. П. Овдиенко, В. А. Шаров, Б. И. Антонов, Э. С. Плотни­ ков, В. И. Косенко, В. В. Половцев, Л . А. Красота, А. X. Най­ манов, О. В. Якушева 2. У Т В Е Р Ж Д Е Н И В ВЕД Е Н В Д ЕЙ С ТВИ Е Постановлением Го­ сударе» венного комитета СССР по стандартам от 04.07.89 № 2319 3. Срок первой проверки — III кв. 92 г. Периодичность проверки — 5 лет 4. ВЗАМЕН ГОСТ 26072—84 5. СТАНДАРТ ПОЛНОСТЬЮ СО О ТВЕТС ТВУЕТ СТ СЭВ 3 4 5 7 -8 1 6. С С Ы Л О Ч Н Ы Е НОРМ АТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМ ЕН­ ТЫ Обоаиачвиие НТД. и* который д а » ссылкаНомер пункта ГОСТ 1 625-75 5.1 ГОСТ 3 1 1 6 -7 7 2.1 ГОСТ 2 2 9 0 -7 6 5.1 ГОСТ 4204—77 3.1 ГОСТ 4 2 3 3 - 77 3.1 ГОСТ 4328—77 2.1 ГОСТ 5962—67 5.1 ГОСТ 6 6 7 2 -7 5 5.1 ГОСТ 6709—72 2.1; 3.1 ГОСТ 8 2 8 4 -7 8 2.1 ГОСТ 9 1 4 7 -8 0 2.1 ГОСТ 9284—75 2.1 ГОСТ 9 9 1 9 -7 6 3.1; 5.1 ГОСТ 13739-78 2.1 ГОСТ 18300-87 2.1 ГОСТ 19569-80 3.1 ГОСТ 2 0 0 1 5 -8 8 5.1 ГОСТ 20292—74 3.1 ГОСТ 2 2 1 8 0 -7 6 3.1 ГОСТ 2 3683-79 3.1; 5.1 ГОСТ 2 4 3 0 3 -8 0 2.1 ГОСТ 2 5 3 3 6 -8 2 3.1
Р е д ак то р Т. И. Василен к оТехнический редактор В. И . М альк оваКорректор £ . И. М о р о зо ваСдано в ИЛ5. Й М » Поди. • (1«ч. 23.09.89 1.0 уел. а. л. 1.0 уел. кр.-отт. 0.80 уч и м . л.Тир. 4 0СОЦеи» 6 к.ГОСТ 26072-89Орден* «Знал Почет*» Итдвтельстио стандартов, 123867. Москва. ГСП. Новопоесиенсхя* не».. 37*п . «Московский печатник». Москва. Лилии пер.. 6. Зак. 888

Похожие документы